發現液氮罐里好多灰，沒辦法只能用純化水沖洗了幾遍，灰都這么多了，估計什么無菌，內毒素之類的就更沒保障了。
想問一下：
一，大家是直接清洗晾干直接裝液氮就使了嗎，還是有什么滅菌方法嗎？
二，因為在檢測細胞庫的各項指標是合格的，所以如果按“一”實施的話來看，液氮條件下細菌是不能生存嗎（細菌直接暴露于液氮）？液氮環境下其他不利條件也能給消除？
三，目前好像對液氮的質量沒有什么特殊的要求，是因為液氮是環境，一些方法不好實施嗎？

回答一：液氮罐使用過程中，內膽會慢慢積蓄水分，并混入雜菌，造成內膽腐蝕，同時降低精液的受精率，影響配種質量，因此每年對液氮罐清洗1-2次。首先把液氮罐內提筒取出，液氮移出，放置2—3天，待罐內溫度上升到0℃左右，再倒人30℃左右的溫水，用布擦洗。若發現個別融化物質粘在內膽底上，一定要細心洗刷干凈。然后再用清水沖洗數次，之后倒置液氮罐，放在室內安全不宜翻倒處，自然風干，或如前所述用鼓風機風干。注意在整個刷洗過程中，動作要輕慢，倒人水的溫度不可超過40℃，總重不要超過2kg為宜。

回答問題二：細菌在液氮里和細胞一樣是休眠，不會死。另外我們復蘇的環境也不是無菌的，所以不用糾結那些在液氮里不繁殖的少量細菌了。

回答問題三：國外很多采用氣態保存如氣相液氮罐，風險較低，因為沒有凍存管與液氮的直接接觸。如果你是采用液氮保存，采用凍存管如果不是玻璃拉絲的形式而是塑料管，一定會存在蓋子處封閉不好液氮滲入的情況，此時需要考慮液氮的質量問題，國外就有專門案例，HBV病毒在液氮中鉆入到凍存管中，這就是液氮中一些外源因子起碼是有隱患的。